瑞士Diaotme组织切片钻石刀的正确使用方法与技巧,对于获取高质量的切片至关重要。以下是对其使用方法及技巧的详细分享:
一、准备工作
1.检查包装:在使用前,应仔细检查钻石刀的外包装盒是否损坏或打开过,确保钻石刀在蓝色塑料盒内,且刀刃洁净。
2.样品块修整:切片前,需要对样品块进行修整,以确保理想的切片。样品块的修整对得到高质量的切片非常关键。修整后的样品块应与钻石刀的刀锋平行,且不应过厚,以避免增加切片时的压力。
二、切片操作
1.室温切片
样本块放置:样本块必须与钻石刀的刀刃平行。
固定螺栓:样本块固定螺栓、刀把等都要拧紧。
钻石刀参数:切角和切速要按照说明书的参数设定。
水槽液体:液体水平面要与钻石刀刃水平,水槽内的水要加到与刀刃接触为止。使用牙签将水槽的左右两边弄湿,但要注意不要碰到刀刃和粘接材料。
2.低温切片
样本修整与切片:使用低温钻石修整刀对冰冻切片、生物样本、工业样本进行修整,然后使用低温切片钻石刀进行切片。低温切片时,容易发生样本粘刀、卷曲、聚团或者漂移等问题,主要原因是低温腔静电。为了解决这些问题,可以使用Static-Line II静电消除器。
温度控制:修整样本或者半薄切片时温度为-80°C,超薄切片时温度为-110°C至-120°C。

三、清洁与维护
1.清洁方法
方法一:使用无脂剃刀将苯乙烯棒切出一个45°斜面,用清洁棒沾取100%乙醇,抖落多余的乙醇,然后清洁棒无压力滑过钻石刀刃。这种方法操作简便,但要注意清洁棒不要接触到粘结区(刀刃与基座)。
方法二:使用毛圈或睫毛移除所有切片后剩余杂物,使用蒸馏水冲洗钻石刀,然后使用干净的压缩空气吹干钻石刀。
方法三:如果干燥的切片或残余粘在刀刃上,可以将钻石刀放进蒸馏水中,加一到两滴中性洗涤液到蒸馏水中,浸泡一晚后取出钻石刀,再用蒸馏水清洗,最后再按照方法一的说明进行操作。对于低温钻石刀,用50%的乙醇代替100%的乙醇进行清洁。
2.维护注意事项
避免使用超声波仪清洗钻石刀,也不要使用酸、碱或有害的溶剂(如丙酮等)清洗钻石刀。
禁止将有机溶剂(如丙酮等)加到刀槽里,以免软化或侵蚀刀口两旁的封槽树脂,造成漏水,降低水的表面张力,导致切片展开不匀,使切片质量下降。
培养细胞离心后的杂质易损坏钻石刀,因此最好不要用钻石刀切片培养细胞。
切片厚度应控制在钻石刀所限范围内,超薄切片厚度一般为200nm,半薄切片厚度一般为1μm,冷冻超薄切片厚度一般为1μm。
四、使用技巧
1.对刀技巧:对刀过程是按一定要求逐渐缩短标本块顶面与刀口间的距离,使之尽可能靠近,但绝不触挨着。操作时应使用切片机上的暗视野光源,利用干涉反光来判断刀口与包埋块之间的距离,实现快速、安全对刀。
2.切片控制:在切片过程中,要仔细调整切片速度、间隙角、切片厚度等参数,并仔细调整刀槽里的水平面直至浸湿刀口、又有良好的反光面为最佳。
3.避免损伤:切片时应绝对避免手指、镊子、载网等硬物碰触刀口,以免损坏刀刃。
使用瑞士Diaotme组织切片钻石刀时,需要严格按照操作说明进行,并注意清洁与维护工作。同时,掌握一些使用技巧也能帮助用户更好地使用这款钻石刀,从而获取高质量的切片。